Как да обезсолим протеин?

Как да обезсолим протеин?
Как да обезсолим протеин?
Anonim

Можете също да обезсолите пробата си чрез ултрафилтрация до 1 десета от предишния обем, която отново се разрежда и повтаря UF стъпката. Най-добрият метод за обезсоляване е обезсоляване чрез гел филтрация срещу 50 mM буфер, отколкото ултрафилтрация (класическа, не центробежна).

Какво е обезсоляването при пречистването на протеини?

Обезсоляването се използва за отстраняване на соли от протеинови разтвори, фенол или неинкорпорирани нуклеотиди от нуклеинови киселини или излишък на омрежващи или етикетиращи реагенти от конюгирани протеини.

Как пречиствате протеините?

При пречистването на насипни протеини, често срещана първа стъпка за изолиране на протеини е утаяване с амониев сулфат (NH4) 2SO4. Това се извършва чрез добавяне на увеличаващи се количества амониев сулфат и събиране на различните фракции от утаения протеин. Впоследствие амониевият сулфат може да бъде отстранен чрез диализа.

Как буферирате обмен на протеини?

Обмяна на буфер, обаче, се извършва чрез първо уравновесяване с колонната смола с буфера, в който трябва да попадне пробата. И в двата случая буферните съставки, пренасящи пробата в колоната ще бъде заменена от разтвора, с който колоната е предварително уравновесена.

Коя от следните хроматографски техники може да се приложи за обезсоляване на протеини?

Както беше споменато по-горе, гел филтриране може ефективно да се използва за протеинобезсоляване и се постига чрез първо уравновесяване на колоната за гел филтриране с вода. Въпреки това, обменът на буфер се осъществява чрез първо уравновесяване на смолата на колоната с целевия буфер.

Препоръчано: