Тъй като клетъчната стена е толкова устойчива на повечето съединения, киселинноустойчивите организми изискват специална техника за оцветяване. Основното оцветяване, използвано при киселинно-устойчиво оцветяване, карболфуксин, е липидноразтворимо и съдържа фенол, който помага на петното да проникне в клетъчната стена. Това е допълнително подпомогнато от добавяне на топлина.
Защо е необходима топлина за киселинно-устойчиво оцветяване?
Нагряването на предметното стъкло помага за омекотяване на восъчния материал върху бактериалната клетъчна стена. Восъчният материал е хидрофобен към воден разтвор, но не и към фенолен разтвор на основен фуксин. Следователно силният карбол фуксин е в състояние да оцвети клетката. При оцветяване те са склонни да издържат на обезцветяване с 20% H2SO4 (сярна киселина).
Как оцветявате бързо с киселина?
Инструкции за бързо оцветяване с киселина
- Изсушаване на въздух и топлина фиксират тънък филм от микроорганизми. …
- Напълнете пързалката с Carbolfuchsin. …
- Пързалка за наводнение с кисел алкохол за 30 секунди. …
- Противооцветете, като залеете слайда с метиленово синьо за 30 секунди. …
- Изсушете слайда, като го поставите между страниците на книга с бибулозна хартия.
Оцветяването по Грам изисква ли топлина?
Оцветяването по Грам обикновено се извършва върху препарат за намазка, който е бил термофиксиран. Една от функциите на фиксирането е да закрепи (фиксира) клетките към предметното стъкло. В биофилма обаче клетките вече са здраво закрепени. Освен това, фиксирана топлинапързалката е суха, но биофилмът е предимно вода.
Кое петно не изисква топлина?
Включва прилагането на основно оцветяване (основен фуксин), обезцветител (киселинно-алкохол) и противооцветител (метиленово синьо). За разлика от оцветяването по Ziehl-Neelsen (Z-N оцветяване), методът Kinyoun на оцветяване не изисква нагряване.
