Параформалдехидът пропуска плазмената мембрана в много случаи до известна степен - тъй като мембраната на ядрената обвивка има различен химически състав (главно по отношение на холестерола), аз не бих предполагам, че е така.
Фиксирането свива ли клетките?
Фиксираните протеини около дупките ще държат рамката стабилна. Всеки вид фиксация обаче може да доведе до много леко свиване на вашите клетки, които вие може да не забележите.
Какво се използва за пермеабилизиране на клетките?
Пермеабилизацията се въвежда, след като клетките са приготвени с фиксиращ агент за иницииране на омрежване на протеини, като формалдехид или етанол. … Двата най-често използвани агента за пермеабилизиране на клетъчната мембрана са детергентите Triton-X 100 или Tween-20, като Tween-20 е по-щадящият от двата.
Какво направи параформалдехидът с клетките?
PFA предизвиква ковалентни кръстосани връзки между молекулите, като ефективно ги слепва в неразтворима мрежа, която променя механичните свойства на клетъчната повърхност. Предишни проучвания съобщават, че клетъчната повърхност се втвърдява след третиране с фиксатор [7–10].
Как пропускате клетка?
Пропускливостта на клетките чрез фиксация на метанол или ацетон, или с помощта на детергент, позволява на антителата да преминават през клетъчнитемембрана и влизат в клетката. Най-често използваният реагент за клетъчна пермеабилизация е нейонният детергент, Triton X-100.
