Използвайте флуорофори, които излъчват в дължина на вълната, по-далеч от автофлуоресцентните съединения във вашата проба. Обикновено за това са най-добри флуорофори с далечна дължина на вълната като CoralLite 647. Доказано е, че наличните в търговската мрежа реагенти като TrueVIEW (VectorLabs) намаляват автофлуоресценцията от множество причини.
Какво причинява автофлуоресценция?
Автофлуоресценцията е излъчване на флуоресцентна светлина от очните структури в отсъствието на натриев флуоресцеин. Състояния, които причиняват автофлуоресценция, са друзена глава на зрителния нерв и астроцитен хамартом. Псевдофлуоресценция възниква, когато синият възбудител и зеленият бариер филтри се припокриват.
Как намалявате фоновата флуоресценция?
Какво можете да направите, за да намалите фоновата флуоресценция
- Опитайте да маркирате етикети с боя, която съответства на различен филтър. …
- Измерете интензитета на флуоресценция от ямка, която съдържа само вашите клетки и лекарството или лечението. …
- Проверете вашите медии. …
- Проверете вашия кораб.
Как потушавате автофлуоресценцията на кръвта?
Един от най-широко използваните методи за потушаване на автофлуоресценцията е обработка на тъкан с оцветител Sudan Black B. Sudan Black B е липидно разтворимо багрило, което се свързва с липофусцин гранули, за да намали тяхната флуоресценция.
Какво е автофлуоресценция в микроскопията?
Автофлуоресценцията е естественото излъчване на светлина от биологичниструктури като митохондрии и лизозоми, когато са погълнали светлина, и се използва за разграничаване на светлината, произхождаща от изкуствено добавени флуоресцентни маркери (флуорофори).