Инкубирайте съда при стайна умерена температура за 2-3 минути . Твърдо прилепналите клетки могат да се отделят бързо при 37 °C. Наблюдавайте клетките под микроскоп. Отделените клетки изглеждат заоблени и пречупващи под микроскоп.
Какво ще стане, ако опитате клетките твърде дълго?
Инкубиране на клетки с твърде висока концентрация на трипсин за твърде дълъг период от време ще увреди клетъчните мембрани и ще убие клетките. Ако не сте сигурни за концентрацията на трипсин, която да използвате, използвайте ниска концентрация.
Как пробвате клетките?
Клетките могат да бъдат ресуспендирани чрез внимателно пипетиране на клетъчната суспензия, за да се разбият бучките. Може да се направи допълнително разреждане, ако е необходимо, за клетъчния брой и/или субкултивиране.
Колко време отнема клетките да се прикрепят?
първите клетки се прикрепват вече след 3-5 мин! Според моя опит повечето EC бяха прикрепени след 10-20 минути. Но колкото по-дълго чакате, толкова по-твърдо е привързаността.
Вредно ли е да се пробват клетки два поредни дни?
Да, вредно е, ако трипсинизирате клетките си непрекъснато след 24 часа разделяне. Препоръчително е да направите разделяне след 48 часа разделяне. … Можете да поддържате клетките, докато морфологията е добра (Зависи от типа на вашата клетка, някои клетки могат да достигнат до 80 пасажа, а други до 10).
