Контролните антитела за зареждане са важни контроли, тъй като показват еднакво зареждане на проби във всички ямки. Контролите за зареждане също показват правилния трансфер на протеини към мембраната по време на процеса на Western blotting. Контролите за зареждане обикновено са протеини с висока и повсеместна експресия.
Какво прави контрола за зареждане?
Контролът за зареждане е протеин, използван като контрола в Western blotting експеримент. … Те се използват, за да се гарантира, че протеинът е зареден еднакво във всички ямки.
Защо използваме контрола за зареждане в Western blot?
Контролите за зареждане имат втора роля като контрола в уестърн блотове. Те могат да се използват, за да се провери дали е имало дори прехвърляне от гела към мембраната през целия гел. Това е наложително, когато се правят сравнения на нивата на експресия на протеин между пробите.
Как използвате контрола за зареждане в Western blot?
Сигналите от контролите за зареждане обикновено се използват за нормализиране на сигналите от протеините, представляващи интерес. За да се използва контрола на натоварване за тези цели, откриването с контролно протеиново антитяло и експерименталното антитяло трябва да се направи на едно и също петно. Разнообразие от различни протеини се използват като контроли за зареждане.
Защо актинът се използва като контрол за зареждане?
Бета-актин, обикновено се използва като контрол за зареждане за Western Blot занормализирайте откритите нива на протеин, като потвърдите, че протеиновото натоварване е едно и също в гела.
